目的寻求一种简单易行的观察视网膜神经节细胞形态学的染色方法。
方法取30d(P30)Long Even’s大鼠6只,雌雄不限,麻醉处死,取眼球后剥离完整视网膜,置于4%多聚甲醛溶液中固定12h,取固定好的视网膜行全视网膜铺片后DiI荧光染色,将视网膜再次置于4%多聚甲醛溶液中避光37℃固定,6d后观察神经节细胞形态。结果染色可见神经节细胞胞体清晰,树突及轴突均匀着色,形态清晰。结论视网膜铺片行DiI染色可以较好的观察神经节细胞形态。
DiI是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。
DiI被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂,通常不会影响细胞的生存力。